NK培養基產品特點：

　　1、培養性能*，支持高密度NK細胞培養；

　　2、可以培養純度比較低的細胞樣品，培養獲得高純度的NK細胞（CD56+/CD3-）；

　　3、如果培養時添加病人自體血漿，效果更為顯著；

　　4、經過微生物檢測（細菌、真菌、霉菌及支原體）、pH檢測、滲透壓和內毒素檢測；

　　5、不含任何動物源的蛋白成分。

　　NK培養基培養操作步驟

　　1、培養皿的包被：按一個10-cm培養皿的表面積計算，將2mlAdvCell細胞墊(BCP0001)與20lAdvCellNK細胞附物(BNKA001)混合后加入培養皿中，4℃下包被過夜。

　　2、按常規免疫細胞培養的一般準則，如需在生物反應器或培養袋中高密度培養，應優化條件來確定操作步驟。使用前將BNSFM0001中的5種組分按如下體積比在37℃下解凍之后混合混合成*培養基:500mlAdvCell免疫細胞基本培養基（BICBM0001）、20mlAdvCell免疫細胞添加物A（BICS0001A）、1mlAdvCell免疫細胞添加物B（BICS0001B）、1mlAdvCellNK細胞添加物A(BNKS001A)、1mlAdvCellNK細胞添加物B(BNKS001B)。

　　3、抽取患者外周血50ml，將采集的血樣轉入50ml離心管，2000rpm離心10min。離心結束后，用移液器吸取上層淡黃色血清于新的50ml離心管，蓋好離心管蓋于40℃水浴鍋中孵育30min。孵育結束后，再1400rpm(340g)離心10min,吸取上清于新的離心管保存4℃備用。

　　4、用移液管將下層的血細胞與生理鹽水1:1混勻，按1：1將懸液緩慢加入裝有淋巴細胞分離液的離心管（注意：不要打亂液面分界保持液面分層明顯）。將離心機的升速與降速調至低，400g離心30min；離心結束后，用5ml移液管吸取中間白膜層于新的50ml離心管，并用生理鹽水洗滌離心兩次，以去除多余血細胞。

　　5、根據計數結果調整細胞濃度，充分混勻后按1-2×106/ml密度接種于含免疫細胞基本培養基（BICBM0001）的培養瓶中，并按10-cm培養皿的表面積添加20lAdvCellNK細胞添加物B（BNKS001B）。當細胞生長到第三天離心換液（340g離心10min）更換新鮮培養基及AdvCellNK細胞添加物B。

　　6、以后4-6天每天鏡檢觀察，根據細胞懸液顏色添加培養液，每次添加應為總體積的三分之一左右。第七天計數，當細胞量大于6×107時，則添加AdvCellNK細胞添加物B；如細胞數量在3-6×107時，則長至第八天添加AdvCellNK細胞添加物B，加液時使總細胞濃度保持在1-1.5×106cell/ml。

　　7、當培養液體積大于150ml或細胞數量大于1.5×108時則需轉移至培養袋培養（氣泡盡量排空，以免影響細胞生長）。第8-11天每天鏡檢觀察計數，根據細胞懸液顏色加培養液。第12-14天觀察需加液時，細胞濃度需保持在2×106cell/ml。當細胞達到所需劑量時，即可離心收集細胞待用。

　　以上就是NK培養基的產品特點和七個培養步驟介紹，給大家參考，并希望有所幫助！